數(shù)字光片顯微鏡 STELLARIS DLS

將共聚焦與光片顯微成像技術(shù)相結(jié)合，探索新應(yīng)用領(lǐng)域

數(shù)字光片顯微鏡 STELLARIS DLS

徠卡顯微系統(tǒng)采用獨特的設(shè)計方法，使您可以在一個系統(tǒng)中進行共聚焦和光片成像， 實現(xiàn)柔和的單平面照明。 我們的數(shù)字光片系統(tǒng)(DLS)采用垂直設(shè)計，可以集成到 STELLARIS 5 和 STELLARIS 8 系統(tǒng)中，也可以作為兩種系統(tǒng)的升級。 這樣，您就可以受益于完整功能的共聚焦和易于使用的光片顯微鏡， 從而能夠進行更多樣化的研究。

圖像： 四日齡的斑馬魚胚胎拼接圖像，已標(biāo)記的內(nèi)皮細(xì)胞。 圖像由法國伊爾基希-格拉芬斯塔登遺傳與分子細(xì)胞生物學(xué)研究所 (IGBMC) 影像中心 Elvire Guiot 博士提供。

讓您能夠進行更多樣化的研究

在STELLARIS 5或STELLARIS 8系統(tǒng)中添加DLS可令您的研究更加多樣化，使您能夠通過簡單的樣本處理和多位置實驗輕松進行不同類型的三維樣本成像。

DLS模塊專為改進活細(xì)胞成像應(yīng)用而設(shè)計，通過單平面照明以及sCMOS攝像頭進行快速成像，可提高細(xì)胞活性。 除了活體樣本外，DLS還可以對經(jīng)過透明化處理的樣本成像，為實現(xiàn)您的研究目標(biāo)提供更大的靈活性。

垂直旋轉(zhuǎn)——共聚焦顯微鏡中如何形成光片？

光片顯微鏡通常需要在獨立系統(tǒng)上構(gòu)建專用的光學(xué)設(shè)置，即照明和檢測物鏡相互垂直。 DLS可輕松實現(xiàn)光片顯微成像。 獨特的TwinFlect反光鏡裝置將照明光片偏轉(zhuǎn)90度。 這種改進方法可將照明和檢測光路集成到每臺具有倒置顯微鏡的STELLARIS系統(tǒng)的垂直軸中。 所有這些改進方法都不會影響共聚焦功能。

實施并進行長時間的觀察記錄

成像需要光照，但光照過強會損傷細(xì)胞。 光片顯微鏡是迄今為止最溫和的成像方法，因為它可以減少光毒性和光漂白造成的總體光損傷。 這可以提高樣本的活性。 光片成像尤其有利于發(fā)育生物學(xué)的研究。 弱光照明與高速采集相結(jié)合，讓您可以長期跟蹤果蠅胚胎等發(fā)育中的敏感生物體，并以三維方式實時了解組織和器官的形成過程。

光片成像原理

光片顯微鏡對樣本進行單平面照明，非常適合敏感樣本或快速生物過程的成像。

由于不存在離焦激發(fā)，可將光毒性的影響局限于焦平面。 此外，通過在光片中移動樣本，您可自動獲得光學(xué)切片，并可對樣本進行三維成像。

快速采集高分辨率圖像

如果成像速度和分辨率不合適，以三維方式長時間觀察快速周期性生物過程（如斑馬魚心跳）可能具有很大的挑戰(zhàn)性。 使用DLS模塊，您可以在兩個先進的sCMOS相機之間進行選擇，以出色的分辨率快速采集圖像，兩個相機都完全集成在LAS X LightSheet Wizard中。

探索三維細(xì)胞培養(yǎng)物，一次觀察多個位置

類器官或球狀體等三維細(xì)胞培養(yǎng)物的有效成像構(gòu)成一系列的新挑戰(zhàn)，因為它們包含很大的體積。 類器官既可以被固定、進行免疫標(biāo)記、使用透明化技術(shù)進行研究，也可以利用活體研究其動態(tài)過程。 由于定義了工作流程，使用DLS研究這些樣本非常簡單，并且可以提供關(guān)于細(xì)胞和分子過程的重要信息。 DLS非常適合滿足透明細(xì)胞和活細(xì)胞制備的需求，讓您能夠更好地研究三維細(xì)胞培養(yǎng)物，這類培養(yǎng)物能夠提供比粘附細(xì)胞的二維細(xì)胞培養(yǎng)物更具生理意義的研究條件。

使用數(shù)字光片顯微鏡探索完整的 3D 細(xì)胞生物學(xué)工作流程 。

適用于活體樣本和經(jīng)透明化處理樣本的光片系統(tǒng)

由于生物組織的不透明性，深層組織顯微成像非常困難。 這正是越來越多的組織透明化方法發(fā)揮作用的地方，但這對于許多成像系統(tǒng)而言是一大挑戰(zhàn)。

DLS模塊不僅可以提供出色的活體樣本成像結(jié)果，而且可以對經(jīng)過各種不同透明技術(shù)處理的樣本進行成像。 使用DLS，您可以在多個檢測物鏡與安裝架之間進行選擇，以呈現(xiàn)經(jīng)過透明化處理的組織和生物體內(nèi)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。

視頻采集條件：

• 檢測物鏡 HC APO L10x/0.30 W DLS

• 圖像大?。?1.39mm x 2.04mm（2x3 拼接）

• Z軸：1.5mm厚度（2um步長，745幀）

• 采集時間：5 分 37 秒

• 激發(fā)：514納米

• 發(fā)射： LP514 nm長通，6 ms曝光時間

從許多其他應(yīng)用中獲益

我們的光片模塊不僅僅是共聚焦顯微鏡的一個附加功能模塊。 STELLARIS與DLS相輔相成，為您的研究擴大了選擇范圍。 例如，您可以使用共聚焦技術(shù)操控樣本，然后使用DLS成像。

只需在LAS X軟件中切換共聚焦模式和光片模式，即可輕松實現(xiàn)這一點。 這樣，光轉(zhuǎn)換或劃痕實驗以及后續(xù)的長時間溫和觀察都將變得容易和方便。

熟悉的樣本制備

DLS采用垂直實驗設(shè)置，因此您可以繼續(xù)采用自己熟悉的樣本制備方式。 樣本裝在傳統(tǒng)的玻璃底有蓋培養(yǎng)皿中，可直接操作。 您甚至還可以在多位置實驗中篩選多個樣本。 利用共聚焦電動載物臺可在一個實驗設(shè)置中對多個樣本成像。 唯一的先決條件是什么？ 樣本每側(cè)需要留出放置TwinFlect反光鏡的空間。

DLS的樣本制備。 樣本嵌入玻璃底培養(yǎng)皿的瓊脂中。 必須去除多余的瓊脂，以便為TwinFlect反光鏡騰出空間。

附加樣本處理工具

使用U形玻璃毛細(xì)管進行樣本裝載

U形玻璃毛細(xì)管有兩種尺寸。 因此它們可與不同的TwinFlect反光鏡搭配使用，并可用作放置樣本的匹配支架。

其他信息

使用旋轉(zhuǎn)裝置來裝載DLS樣本

FEP管折射率為1.338，通常用于裝載浸入水溶液的樣本。 為了以最佳方式對齊樣本以便成像，專門設(shè)計了一個旋轉(zhuǎn)裝置來調(diào)節(jié)視角。

其他信息

使用安裝支架進行樣本制備

此處顯示的徠卡安裝框架為進行DLS成像所需的樣本制備提供了一項重要優(yōu)勢： 能夠制備更多數(shù)量的樣本，可與BABB（苯甲醇苯甲酸芐酯）等潛在有害試劑一起使用。

其他信息

光片與共聚焦技術(shù)結(jié)合的優(yōu)勢

由于無縫集成DLS，您的光片成像可以受益于STELLARIS系統(tǒng)的技術(shù)創(chuàng)新。

始終使用合適的激光

STELLARIS共聚焦顯微鏡的所有可見激光均可用于光片成像。 使用可選的固定譜線激光器和STELLARIS新一代光激光，可以非常靈活地為光片實驗選擇合適的染料。 使用STELLARIS 8，您現(xiàn)在甚至可以實現(xiàn)近紅外染料的成像。

始終使用合適的掃描器

在配備 雙掃描器的STELLARIS系統(tǒng)中，您可以 在共振快速掃描頭或 高分辨掃描頭（1400Hz）之間進行選擇，以便生成掃描的光片。 使用共振快速掃描頭生成光片時像素停留時間更短，有利于更溫和地成像。

以工作流程為導(dǎo)向的軟件設(shè)計

LAS X軟件可逐步指導(dǎo)用戶完成數(shù)據(jù)記錄和評估。以工作流程為導(dǎo)向的設(shè)計可幫助您更高效地使用儀器。 便捷的校準(zhǔn)程序可精確確定光片。

設(shè)計中采用雙側(cè)照亮樣本方法：兩塊TwinFlect反光鏡相對放置，均可被掃描器瞄準(zhǔn)，從而消除陰暗區(qū)域。 要在較大視場中獲得清晰圖像，可以使用LAS X軟件中LightSheet Wizard的在線或離線融合選項合并這兩張圖像。

您可根據(jù)自己的需求通過LAS X定制該軟件。 LAS X 3D Visualization模塊以直觀裁剪、快速渲染和立體顯示等新方法交互處理三維數(shù)據(jù)。 區(qū)塊掃描實驗可使您觀察大面積區(qū)域。 “標(biāo)記和查找”實驗可使您在多位置的設(shè)置中觀察多個感興趣的區(qū)域。

優(yōu)質(zhì)光學(xué)元件

適合廣泛應(yīng)用領(lǐng)域的優(yōu)質(zhì)物鏡是 徠卡顯微系統(tǒng)的標(biāo)志性特征之一。   垂直轉(zhuǎn)動光片的系統(tǒng)核心由 物鏡和 TwinFlect 反光鏡裝置構(gòu)成。

您可以根據(jù)實驗的要求，通過選擇不同的照明物鏡來形成光片。

要呈現(xiàn)最微小的細(xì)節(jié)、獲得更大的視場 或匹配成像介質(zhì)的折射率，您可以從越來越多的選件中挑選最佳的檢測物鏡。

方便的數(shù)據(jù)處理

以三維方式長時間觀察過程會生成大量數(shù)據(jù)。 LAS X軟件中集成了多種工具，有助您方便地管理這些數(shù)據(jù)。 在線融合工具讓您既可以選擇保留原始數(shù)據(jù)， 也可以只保存合并后的圖像以節(jié)省磁盤空間。 您的數(shù)據(jù)會在采集過程中自動存儲。 智能加載功能可以讓您方便地查看數(shù)據(jù)，直接訪問大型延時數(shù)據(jù)集中感興趣的時間點或Z軸。 您可以編譯所需的后期處理步驟，使其在一個自動流程中完成。

理想的環(huán)境條件

軟件控制的氣候室可保持最適宜樣本的環(huán)境條件。 用戶可使用LAS X環(huán)境控制模塊全面控制實驗條件。 在實驗過程中可監(jiān)測所記錄的環(huán)境數(shù)據(jù)。 您可在一個界面中設(shè)置所有環(huán)境條件，例如可以運行熱休克實驗的溫度曲線。

在大孵育箱或小孵育箱解決方案之間進行選擇。